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免疫組化試劑盒代測

免疫組化試劑盒代測

簡要描述:

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免疫組化試劑盒代測服務內容與實驗周期

服務內容

實驗周期

石蠟包埋

5-7

石蠟切片

5-7

染色(自帶一抗)

1-2周(視片數而定)

染色(我公司提供一抗)

1-2周(視片數而定)

TUNEL(自帶試劑盒)

1-2周(視片數而定)

TUNEL(我公司全包)

1-2周(視片數而定)

組織脫鈣

20-30

HE染色

1-2周(視片數而定)

冰凍切片

1-2周(視片數而定)

 免疫組化操作步驟

⑴、石蠟切片脫蠟至水。

⑵、 3%H 2 O 2 室溫孵育 5-10 分鐘,以消除內源性過氧化物酶的活性。

⑶、蒸餾水沖洗, PBS 浸泡 5 分鐘 x2 (如需抗原修復,可在此步后進行)。

⑷、 5-10% 正常山羊血清(PBS 稀釋)封閉,室溫孵育 10 分鐘,傾去血清,勿洗。滴加 一抗 工作液, 37 ℃ 孵育 1-2 小時或 4 ℃ 過一晚。

⑸、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

⑹、滴加適量 生物素標記二抗工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分鐘。

⑺、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

⑻、滴加適量的 辣根酶或堿性磷酸酶標記的鏈霉卵白素工作液, 37 ℃ 孵育 10-30 分鐘。

⑼、 PBS 沖洗, 5 分鐘 x3 次。

⑽、顯色劑顯色 3-15 分鐘(DAB 或 NBT/BCIP)

⑾、自來水充分沖洗,復染,脫水,透明,封片。

免疫組化染色步驟

冰凍切片 4-8um ,室溫放置 30 分鐘后,入 4 ℃丙酮固定 10分鐘,PBS洗,5分鐘x3,用過氧化氫孵育5-10分鐘,消除內源性過氧化物酶的活性。

免疫組化判定分析

 免疫組化染色(IHC)

從實驗結果而言,免疫組化技術服務主要涉及抗體實驗結果的描述與分析,圖片的確定與選取,相關數據的提供,上述工作是免疫組化工作的重點內容,只有嚴格的實驗設計,標準的實驗操作,專業化的結果分析才能更好的滿足客戶的要求,這點對于形式為腹水,上清,培養液之類的抗體顯得更為重要。關于上述服務內容應該在實驗開始前由雙方明確,一般而言,客戶方實驗前應提出需要什么樣的結果與分析,例如是簡要還是詳細的描述實驗結果,需要實驗數據否,圖片的數量與規格等。如果為雙盲試驗或有第三方參與,則事先申明。

免疫組化代測

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