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服務熱線:4008-013-053/021-51870610  
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睪酮檢測試劑盒

睪酮檢測試劑盒

簡要描述:

本試劑盒用于測定科研血清、血漿及相關液體樣本中睪酮(T)含量。

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所有產品僅供科研使用,不能用于食用和醫療等

睪酮檢測試劑盒
試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:   96T 
0.4nmol/L   - 12nmol/L   
使用目的:
本試劑盒用于測定科研血清、血漿及相關液體樣本中睪酮(T)含量。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人睪酮(T)水平。用純化的人睪酮(T)抗體包被微
孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入睪酮(T),再與HRP 標記的睪酮(T)抗體
結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP
酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的睪酮(T)
呈正相關。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人睪
酮(T)濃度。  
試劑盒組成  
1  30 倍濃縮洗滌液  20ml×1 瓶  7  終止液  6ml×1 瓶
2  酶標試劑  6ml×1 瓶  8  標準品(24nmol/L )  0.5ml×1 瓶
3  酶標包被板  12孔×8 條  9  標準品稀釋液  1.5 ml×1 瓶
4  樣品稀釋液  6ml×1 瓶  10  說明書  1 份
5  顯色劑 A 液  6ml×1 瓶  11   封板膜  2 張    
6  顯色劑 B 液  6ml×1/ 瓶  12  密封袋  1 個
標本要求  
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含 NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP )活性。
操作步驟
1.   標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀
釋。
12nmol/L   5 號標準品  150µl 的原倍標準品加入 15 0µl 標準品稀釋液
6nmol/L  4 號標準品  150µl 的5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
3nmol/L  3 號標準品  150µl 的4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
1.5 nmol/L   2 號標準品  150µl 的3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液
0.7 5 nmol/L  1 號標準品  150µl 的2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 
 2.   加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、
待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,
然后再加待測樣品 10 µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡
量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.   溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。      
4.   配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.   洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復5 次,拍干。
6.   加酶:每孔加入酶標試劑 50µl,空白孔除外。  
7.   溫育:操作同 3。
8.   洗滌:操作同 5。
9.   顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15分鐘.
10.  終止:每孔加終止液50µl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.  測定:以空白空調零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。  測定應在加終止
液后15 分鐘以內進行。
睪酮檢測試劑盒
操作程序總結:
計算
    以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的
OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與 OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,
即為樣品的實際濃度。  
注意事項
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未
用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在 5 分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值
大于標準品孔*孔的 OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n 倍)后再測定,計
算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.  如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6 個月 
    

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